滅菌法——是指用物理或化學方法殺滅全部微生物,包括致病的和非致病的微生物,以及細菌芽孢的過程,從而造成對活的。即具有增殖能力的微生物(特別是細菌和真菌l勿使存活(無菌狀態)的操作。主要是殺死微生物,也包括用過濾等方法除去菌體的操作。

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熱力滅菌法

利用高溫,使微生物細胞內的一切蛋白質變性,酶活性消失,致使細胞死亡。通常有幹熱、濕熱和間歇加熱滅菌等法。

①幹熱滅菌

直接利用火焰將微生物燒死。不能用火焰滅菌的物品則利用熱空氣滅菌,將物品放在烘箱中加熱到160~170℃,持續90分鍾,此法適用於玻璃、金屬和木質的器皿。

②濕熱滅菌

以沸水、蒸氣和蒸氣加壓滅菌。巴氏滅菌法就是濕熱滅菌,此法有兩種方式,一是低溫長時間處理,即在61.7~62.8℃下處理30分鍾;二是高溫短時間處理,在71.6℃或略高溫度下處理1 5分鍾。以蒸氣加壓滅菌效果最好,可用常壓蒸氣滅菌,也可在高壓蒸氣鍋中滅菌,其蒸氣溫度可達121℃,能將耐熱的芽孢在30分鍾內全部殺死。但對某些易被高壓破壞的物質,如某些糖或有機含氮化合物,宜在1 10℃滅菌15~30分鍾。

③間歇加熱滅菌

連續3天,每天進行一次蒸氣滅菌的方法。此法適用於不能耐100℃以上溫度的物質和一些糖類或蛋白質類物質。一般是在正常大氣壓下用蒸氣滅菌1小時。滅菌溫度不超過100℃。不致造成糖類等物質的破壞,而可將間歇培養期間萌發的孢子殺死,從而達到徹底滅菌的目的。

輻射滅菌法

在一定條件下利用射線進行滅菌的方法。較常用的有紫外線,其他還有電離輻射。波長在25 000~80 000納米之間的激光也有強烈的殺菌能力,以波長26 500納米最有效。輻射滅菌法僅限於某些材料,因所需設備複雜,難於廣泛使用。

滲透壓滅菌法

利用高滲透壓溶液進行滅菌的方法。在高濃度的食鹽或糖溶液中細胞脫水,不能進行正常的新陳代謝,結果導致微生物的死亡。

化學試劑滅菌法

大多數化學藥劑在低濃度下起抑菌作用,高濃度下起殺菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇、1%氯化汞水溶液、3%~5%煤酚皂液、各種消毒肥皂液和某些氣體(如環氧乙烷)等消毒劑的滅菌。